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作者:admin?????時間:2015-08-31 10:11:40
產品簡介:
Jingan M-MuLV反轉錄酶(RNase H-),即Jingan M-MuLV Reverse Transcriptase(RNase H minus)是一種經過改造和優化的M-MuLV反轉錄酶(RNase H-)。和普通的M- MuLV反轉錄酶相比,Jingan M-MuLV反轉錄酶(RNase H-)也是一種依賴于RNA或DNA模板的DNA聚合酶,可以以RNA或DNA為模板在引物存在的情況下完成互補DNA鏈的合成;但缺失了Ribonuclease H(RNase H)酶活性,不能夠選擇性剪切RNA和DNA雜合雙鏈中的RNA。Jingan M-MuLV反轉錄酶(RNase H-)是最常用的反轉錄酶之一。 特點:Jingan M-MuLV反轉錄酶(RNase H-)可以合成長達13kb的cDNA,而普通的M-MuLV反轉錄酶(RNase H-)僅能合成長達9kb的cDNA; Jingan M-MuLV反轉錄酶(RNase H-)的最適反應溫度為42-45℃并且在55℃時仍然有很高活性,可以避免普通的M-MuLV反轉錄酶(RNase H-)在37℃反應時的一些不足。 用途:Jingan M-MuLV反轉錄酶(RNase H-)常用于在獲得總RNA或mRNA后cDNA第一條鏈的合成。Jingan M-MuLV反轉錄酶(RNase H-)合成 的cDNA第一條鏈后續可以用于PCR、real-time PCR、cDNA第二條鏈的合成等。Jingan M-MuLV反轉錄酶(RNase H-)也可以用于DNA探針的標記,通過引物延伸(primer extention)來分析RNA,以 及用于基因芯片熒光探針的標記。 來源:本Jingan M-MuLV反轉錄酶(RNase H-)由大腸桿菌表達,表達的基因為經過突變優化的編碼Moloney Murine Leukemia Virus reverse transcriptase的pol基因片斷。 活性定義:One unit of the enzyme incorporates 1 nmol of dTMP into a polynucleotide fraction in 10 min at 37℃. Enzyme activity is assayed in 50 mM Tris-HCl(pH 8.3), 6 mM MgCl2, 10 mM DTT, 40 mM KCl, 0.5 mM dTTP, 0.4 MBq/ml [3H]-dTTP, 0.4 mM polyA·oligo(dT)12-18。 純度:不含DNA內切酶、外切酶和磷酸酯酶和RNA酶,可以滿足常規反轉錄合成cDNA第一條鏈等的需要。 酶儲存溶液:50 mM Tris, pH 8.3, 100mM NaCl, 1 mM EDTA, 5 mM DTT, 0.1% Triton X-100 and 50% glycerol。 Reaction Buffer(5X):250 mM Tris, pH 8.3 at 25℃, 250 mM KCl, 20 mM MgCl2, 50 mM DTT。 失活或抑制:70℃孵育10分鐘可以導致Jingan M-MuLV反轉錄酶(RNase H-)失活;EDTA、EGTA等螯合劑、無機磷酸鹽或焦磷酸鹽以及聚氨 (polyamine)對Jingan M-MuLV反轉錄酶(RNase H-)有抑制作用。 本產品中Jingan M-MuLV反轉錄酶(RNase H-)的濃度為200U/μl,用于體積為20微升的反轉錄體系時足夠進行10次反轉錄反應。 包裝清單:
產品編號
產品名稱
包裝
D7159-1
Jingan M-MuLV反轉錄酶(RNase H-)
2000U
D7159-2
Reaction Buffer(5X)
0.2ml
-
說明書
1份
保存條件: -20℃保存。 注意事項: 對于GC含量比較高的RNA的反轉錄,試劑盒的使用說明中給予了特別說明,請予以關注。 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。